Cell Line Nucleofector? Kit V——用于難轉(zhuǎn)染細胞系試劑盒V
Amaxa?Nucleofector?技術(shù)是 Lonza(原Amaxa)公司的專利創(chuàng)新技術(shù),它綜合應(yīng)用傳統(tǒng)的電穿孔技術(shù)及細胞特異性細胞核轉(zhuǎn)染液,通過調(diào)整優(yōu)化的電轉(zhuǎn)參數(shù)(內(nèi)存轉(zhuǎn)染程序),直接把外源基因?qū)朐毎凹毎档募毎麧{和細胞核中。它不同于傳統(tǒng)的電穿孔儀,因為它可以把外源基因直接導入核中,而且細胞存活率遠遠高于電穿孔儀。
Cell Line Nucleofector? Kit V 可以用于Nucleofector? IIs/2b轉(zhuǎn)染儀,這是一種單孔細胞核轉(zhuǎn)染儀,支持單孔電轉(zhuǎn)杯的轉(zhuǎn)染平臺,適用于難轉(zhuǎn)染細胞系和原代細胞的高效轉(zhuǎn)染。
與NucleofectorTM IIs/2b儀器搭配使用轉(zhuǎn)染細胞系,Lonza提供5種不同的Nucleofector溶液,C、L、R、T、V,分別適用于不同細胞系。每種試劑盒都提供3種規(guī)格,可用于10, 25, 100 (4x25)次反應(yīng)。其中,Nucleofector? L和V溶液需與細胞系優(yōu)化試劑盒聯(lián)合使用。
產(chǎn)品優(yōu)勢
1.轉(zhuǎn)染效率高達90%;
2.數(shù)小時內(nèi)即表達,在一天內(nèi)可完成轉(zhuǎn)染至分析全部過程。
試劑盒組分
1. 細胞特異性核轉(zhuǎn)染液
2. 添加劑
3. 一次性吸管(與單孔電轉(zhuǎn)杯配套)
4 .pmaxGFP? 陽性質(zhì)粒
5. 單孔電轉(zhuǎn)杯(100μl)
Nucleofector 細胞核轉(zhuǎn)染技術(shù)操作步驟(詳細Protocol請登錄Lonza官方網(wǎng)站查閱)
整個操作過程只需四步,非常簡單、高效。
第1步:處理細胞,精確計數(shù)
第2步:混合DNA、轉(zhuǎn)染液,重懸細胞,加入轉(zhuǎn)染杯
第3步:將轉(zhuǎn)染杯放入轉(zhuǎn)染儀,按鍵選擇相應(yīng)程序,按"start"鍵開始轉(zhuǎn)染,10秒鐘左右
第4步:取出細胞繼續(xù)培養(yǎng)。